Frustré par le nombre d’œufs fécaux ?

Des solutions simples aux problèmes courants rencontrés par les vétérinaires et les techniciens lors de l’exécution des FEC

Le nombre d’œufs dans les selles (FEC) est à la base des programmes modernes de lutte contre les parasites équins. Cependant, compter ces œufs de parasites de manière fiable pour obtenir les informations dont vous avez besoin pour prendre des décisions intelligentes en matière de vermifugation peut être frustrant. Dans cet article, Martin Nielsen, DVM, PhD, Dipl. ACVM, EVPC, Schlaikjer Professor of Equine Infectious Diseases in the Gluck Equine Research Center at the University of Kentucky, in Lexington, propose des solutions à sept problèmes courants rencontrés par les praticiens équins et leurs techniciens lors de la réalisation de FEC.

Problème : Mes clients ne comprennent pas le but des FEC.

Solution: Consultez les directives de contrôle des parasites internes de l’AAEP, fréquemment mises à jour, pour parfaire vos connaissances de base sur les parasites internes.

Nielsen est co-auteur des lignes directrices de l’AAEP, qui décrivent les principaux objectifs des FEC :

1. Effectuer des tests de réduction du nombre d’œufs fécaux (FECRT) pour surveiller la résistance aux anthelminthiques (vermifuges) chez les petits strongles (cyathostomines) et les ascaris (Parascaris spp).
2. Identifier les animaux nécessitant un traitement vermifuge dans le cadre d’un protocole de traitement vermifuge ciblé. De tels régimes de contrôle basés sur la surveillance éliminent le déparasitage par cœur, dans le but de préserver des anthelminthiques chimiques efficaces.
3. Identifier la présence d’œufs d’ascaris chez les jeunes animaux et vermifuger les animaux affectés lorsque cela est indiqué avec un anthelminthique approprié.

Faites effectuer des FEC au moins deux fois par an sur tous les chevaux adultes. Cela vous permet de classer les chevaux en fonction de leur niveau d’excrétion d’œufs, car tous les chevaux ne rejettent pas les œufs de parasites dans la même mesure. La recherche montre qu’un petit pourcentage de chevaux, surnommés « à gros excréteurs », sont responsables de l’excrétion de la majeure partie des œufs dans une ferme. C’est la règle du 80/20 : 20 % des chevaux d’une ferme pondent 80 % des œufs.

Les excréteurs faibles ont moins de 200 œufs par gramme (EPG) de matières fécales, tandis que les excréteurs modérés et élevés ont respectivement plus de 200 et 500 à 1 000 EPG.

« L’objectif principal de la FEC est d’identifier les faibles et les hauts shedders », explique Nielsen. « Les excréteurs moyens entre 200 et 500 EPG ne sont pas aussi importants. »

Problème : Je ne sais pas quels chevaux vermifuger en fonction du FEC.

Solution: Concentrez-vous sur les excréteurs modérés/élevés aux moments appropriés de l’année.

Le déparasitage uniquement des excréteurs élevés aide à réduire la pression de sélection pour la résistance aux anthelminthiques. La plupart des chevaux n’ont généralement besoin d’être vermifugés qu’une ou deux fois par an, mais les grands excréteurs ont souvent besoin d’un vermifuge plus fréquent.

Cependant, ne vermifugez pas simplement parce que le nombre d’œufs d’un cheval dépasse 200 EPG. Des experts tels que Nielsen préconisent de vermifuger les chevaux qui ont plus de 200 EPG uniquement aux moments appropriés de l’année lorsque les conditions environnementales favorisent le développement des larves au pâturage. Par exemple, ne vermifugez pas pendant l’hiver dans les climats tempérés froids et pendant l’été dans les climats chauds/chauds lorsque les œufs de strongles sont peu susceptibles de se transformer en larves infectieuses.

Bien que le nombre d’œufs puisse identifier les excréteurs importants, il ne peut pas identifier les animaux fortement parasités ni diagnostiquer la maladie.

« Le nombre d’œufs ne peut jamais indiquer le rôle des parasites dans la maladie ni même prédire le risque de maladie », déclare Nielsen. « Beaucoup de gens croient encore que le nombre d’œufs est en corrélation avec la charge de vers, et je corrige cette idée fausse chaque semaine. »

Voici quelques raisons pour lesquelles nous ne pouvons pas utiliser le nombre d’œufs pour établir les charges de vers :

• Plus de 50 espèces de parasites strongles produisent le même œuf de parasite de type strongle. Certaines espèces pondent plus d’œufs que d’autres, il devient donc impossible de relier le nombre d’œufs au nombre de vers.
• Les vers passent par des phases de la vie. Lorsqu’elles sont prématurées, elles ne produisent pas d’œufs. Lorsqu’elles sont jeunes adultes, elles produisent plus d’œufs que lorsqu’elles vieillissent. À la fin de leur vie, elles ne produisent plus d’œufs. Compte tenu de cette variation au cours de la vie d’un ver, le nombre d’œufs n’est pas directement lié au nombre de vers présents.
• Le système immunitaire de l’hôte supprime la perte d’œufs. Deux chevaux peuvent avoir exactement le même nombre de vers et de types d’espèces et de stades présents, mais avoir un nombre d’œufs très différent.
• De grandes populations de vers femelles suppriment mutuellement la production d’œufs. Si un cheval abrite de nombreux parasites internes adultes, chaque femelle produit moins d’œufs que lorsque seuls quelques individus sont présents (et chaque ver produit un plus grand nombre d’œufs).

Problème : Je ne sais pas quelle technique de comptage des œufs utiliser.

Solution : Recherchez et comprenez vos options.

Le principe de base d’un flotteur fécal est de séparer les ovules parasites de la masse des détritus fécaux à l’aide d’un milieu liquide dense qui permet le comptage ultérieur des ovules. Les vétérinaires peuvent envoyer des échantillons fécaux à un laboratoire FEC commercial pour éviter d’effectuer eux-mêmes cette tâche fastidieuse, ou ils peuvent exécuter des FEC en interne en utilisant un McMaster modifié (la technique standard de l’industrie et la plus populaire), le Wisconsin, le Mini-FLOTAC ou un nouveau technique automatisée.

Les facteurs affectant le test utilisé par votre pratique comprennent la précision, l’exactitude, l’expérience et la formation du personnel effectuant le test, ainsi que le coût.

Problème : Comment savoir si mon test est fiable ?

Solution: Comprendre les sources d’erreur et de variabilité lors de l’exécution des FEC.

Un test FEC fiable est un test précis, qui est une mesure de la variation entre des comptages répétés du même échantillon. La précision est synonyme de répétabilité.

« Étant donné que l’utilisation la plus importante de la FEC est de tester la résistance, nous devons être en mesure de faire la différence entre une variation normale des comptes et un manque d’efficacité du vermifuge », explique Nielsen. « Un test imprécis peut conduire à de mauvaises conclusions. »

Par exemple, un test imprécis pourrait suggérer que la résistance est présente dans une ferme spécifique alors qu’elle ne l’est pas.

Les facteurs affectant la précision FEC se répartissent en deux catégories principales :

1. Sources biologiques de variation. Celles-ci se produisent parce que la distribution des œufs dans les matières fécales n’est pas uniforme, ce qui signifie que les échantillons prélevés sur le même animal varient.
2. Sources techniques de variation. Une telle variation se produit parce que les ovules se perdent pendant le traitement, y compris les étapes de filtration, de flottation, de mélange et de mise en suspension. La formation et l’expérience de l’analyste lisant l’échantillon peuvent également contribuer à des erreurs techniques.

« La performance et la fiabilité d’une technique donnée dépendent fortement de la personne chargée de la mettre en œuvre », explique Nielsen.

Problème : Comment puis-je minimiser les sources techniques de variation ?

Solution A : Formation de technicien d’adresse.

« L’achèvement des FEC sous la pression du temps affecte négativement à la fois l’exactitude et la précision », déclare Nielsen. « Dans un cabinet vétérinaire très fréquenté, un grand nombre d’échantillons peuvent devoir être analysés dans un délai précis. Pour être efficaces, les techniciens peuvent abréger le test, en prenant moins de temps pour compter les œufs sur les lames, ou ne compter qu’une des deux chambres sur la grille McMaster (par exemple) pour s’adapter à la charge de travail.

Dans une étude (Slusarewicz et al., 2019), Nielsen et ses collègues ont démontré l’effet de la compétence de l’opérateur sur les FEC en limitant la durée de comptage des techniciens en limitant le temps de comptage ou en leur faisant compter l’une des deux grilles McMaster. Les résultats ont montré que les techniciens prenaient en moyenne 4,1 minutes pour effectuer un FEC. Avec un temps de comptage limité à une minute, le nombre d’œufs a diminué de 50 à 60 % par rapport à ceux comptés au loisir du technicien. Lorsque les techniciens disposaient de deux minutes pour effectuer le FEC, les comptages étaient inférieurs de 10 % aux comptages à loisir, ce qui reste une différence hautement significative. Compter une seule des deux grilles McMaster a également réduit la précision.

Résolution B : Adoptez des systèmes automatisés dans votre pratique.

Les systèmes de comptage automatisé des œufs ont été conçus, au moins en partie, pour réduire la variation inter- et intra-analyste pendant le processus de comptage manuel. Avec ces systèmes, le technicien utilise un algorithme d’analyse d’image pour effectuer le comptage.

« Lors du développement de systèmes automatisés, nous voulions éliminer l’erreur humaine dans le processus de comptage et donc augmenter la précision », explique Nielsen.

Des chercheurs du Gluck Center et de la Lincoln Memorial University, à Harrogate, Tennessee, ont récemment comparé les techniques McMaster et Wisconsin à un système FEC automatisé pour évaluer la variabilité technique et déterminer la sensibilité et la spécificité des tests (Cain et al., 2020 ; Nielsen était un coauteur). Les données ont montré que les algorithmes automatisés de comptage des œufs améliorent considérablement la précision par rapport aux méthodes manuelles pour les échantillons dont le nombre d’œufs est supérieur à 200 EPG.

« Cette étude a également révélé que le nombre d’œufs du Wisconsin était nettement inférieur à celui des autres techniques évaluées dans cette étude, preuve d’un manque de précision », déclare Nielsen.

Ces systèmes améliorent la précision, mais le filtrage, le mélange, la suspension et, surtout, l’erreur de l’opérateur affectent toujours les résultats FEC. Les chercheurs améliorent encore cette technologie.

Solution C : Recueillir et conserver les échantillons de manière appropriée.

Prélevez des échantillons fécaux fraîchement évacués datant de moins de 12 heures. À 20 °C (68 F), les œufs dans les matières fécales peuvent éclore en une journée, ce qui rend les FEC peu fiables. Étant donné que l’éclosion des œufs est un processus aérobie (nécessitant de l’oxygène), le stockage des échantillons fécaux fraîchement prélevés dans des sacs hermétiques à fermeture à glissière en dessous de 6 ° C (42 F – donc au réfrigérateur) empêchera les œufs d’éclore. Vous pouvez conserver des échantillons comme celui-ci pendant cinq jours sans affecter le nombre d’œufs.

Problème : Je ne sais pas quoi faire des résultats de la FECRT lorsqu’il semble que j’ai détecté une résistance aux anthelminthiques dans un troupeau.

Solution: Répétez le test.

« Les vétérinaires doivent d’abord répéter le test pour confirmer la résistance et exclure d’autres causes d’efficacité réduite du vermifuge », déclare Nielsen. « Si la résistance est confirmée, les chevaux affectés doivent être vermifugés en utilisant une autre classe d’anthelminthiques. »

Les vétérinaires doivent tester la résistance à l’aide du FECRT chaque année, en comptant 10 à 14 jours après le traitement anthelminthique. « Le déparasitage sans tests de résistance de routine est irresponsable », ajoute-t-il. « Le FECRT est le seul test de terrain capable d’évaluer l’efficacité des anthelminthiques. »

Parce qu’il s’agit d’un test de troupeau, Nielsen recommande généralement d’inclure un minimum de six chevaux dans un local.

« Moins de chevaux peuvent être inclus dans les cas où six chevaux positifs au nombre d’œufs ne sont pas disponibles ; les résultats doivent simplement être interprétés avec plus de prudence », a-t-il déclaré.

Problème : Je ne comprends pas le facteur de multiplication.

Solution: Calculez votre facteur de multiplication à partir des instructions de votre protocole.

Pour la technique McMaster modifiée (décrite dans les lignes directrices de l’AAEP), la dernière étape de la procédure consiste à multiplier par 25 le nombre d’œufs de strongles comptés dans la grille de la chambre. Il ne s’agit pas d’un nombre fixe applicable à toutes les variantes de la technique McMaster.

« Le facteur de multiplication est dépendant du protocole et déterminé à partir de trois nombres : le poids de l’échantillon en grammes, le volume de liquide (dans lequel) il est en suspension en millilitres, et le volume de sous-échantillon examiné au microscope, également en millilitres,  » dit Nielsen.

Par exemple, le protocole McMaster décrit dans les Lignes directrices utilise 4 grammes de matières fécales en suspension dans 26 ml de milieu de flottation pour obtenir un total de 30 ml de milieu de suspension. Une aliquote de 0,3 mL de cette suspension est présente sous les grilles dans les deux chambres de comptage examinées au microscope. Par conséquent, le facteur de multiplication est :

(30 ml de milieu de suspension/4 g de matières fécales)/
0,3 ml de suspension
= 25 EPG

Mais, si vous utilisez un autre protocole McMaster dans lequel 4 grammes de matières fécales sont suspendus dans 56 ml de milieu de flottation, ce qui donne 60 ml de suspension, votre facteur de multiplication passe à 50. « Si vous comptez une chambre au lieu de deux, le facteur de multiplication change encore une fois », déclare Nielsen. « Et si vous ne pesez pas les matières fécales pour commencer, vous ne pouvez pas du tout estimer le facteur de multiplication. »

Il dit qu’un autre problème est que beaucoup de gens interprètent à tort le facteur de multiplication comme une mesure de performance. Ils croient qu’un petit facteur de multiplication est en quelque sorte corrélé avec une technique meilleure ou plus sensible. « Le facteur de multiplication est simplement dérivé du protocole », explique Nielsen. « Cela ne nous dit rien sur les performances. »

Message à emporter

Le nombre d’œufs fécaux joue un rôle irremplaçable dans les programmes de contrôle des parasites internes équins (sur lesquels vous pouvez en savoir plus dans cette fonctionnalité détaillée). L’utilisation correcte d’une technique de comptage des œufs peut fournir des informations précieuses pour identifier la résistance aux anthelminthiques et vermifuger les chevaux de manière sélective. La compréhension et le contrôle des sources techniques de variation peuvent améliorer la précision.

Divulgation: Le Dr Martin Nielsen détient des actions de Parasight Inc., une société qui fabrique une technique automatisée de comptage des œufs de parasites.